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總結hyclone胎牛血清正確存放與解凍的方法
瀏覽次數:282發布日期:2022-03-23
  hyclone胎牛血清富含蛋白、生長因子、氨基酸、脂類、碳水化合物、維生素、微量元素等成分,是體外細胞培養所需的重要營養物質之一,也是抗體藥研發人員經常使用的原料試劑,其血源和生產工藝決定了最終產品的品質和性能。
 
  hyclone胎牛血清的正確存放與解凍是各位實驗家尤為關注的一個問題,經過專業人員從其成分中分析,在保證質量的前提下,正確存放與解凍的方法,總結如下:
 
  1)保存血清較好的方法?
 
  我們建議血清應保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
 
  2)如何解凍血清才不會使產品質量受損?
 
  我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。
 
  3)血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
 
  血清中沉淀物的出現有許多種原因,但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。
 
  若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
 
  4)為什么要熱滅活血清?
 
  加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
 
  5)有必要做熱滅活嗎?
 
  實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保血清的質量!
 
  6)為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現少量沉淀?
 
  hyclone胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。
 
  7)如何避免沉淀物的產生?
 
  我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:
 
  解凍血清時請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍血清時請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
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